上海安亭科学离心机离心纯化方法的选择
常用的离心纯化方法包括以下三种：差速离心法，速率区带离心法，等密度区带离心法。
差速离心法：常用于生化样品的粗制品提取利用不同的悬浮粒子在离心力场中沉降系数的差别,在同一离心条件下,不同粒子沉降速度不同,通过不断增加相对离心力,使一个非均匀混合液体分散系统中各种大小、形状不同的粒子分层沉淀。操作过程中一般是在第一级离心后将上清液与沉淀分开,然后将上清液再在更高转速条件下离心,分离出第二部分沉淀,如此往复逐级加高转速,逐级分离出所需要的物质。差速离心的分辨率不高,沉淀系数在同一个数量级内的各种粒子不容易分开,常用于生化样品的粗制品提取。
速率区带离心法：是一种不完全的沉降分离,沉降效果受物质本身物理尺度的影响较大,一般应用在物质大小相异而密度相同的情况, 是指根据待分离的粒子在离心力作用下，在梯度液中沉降速度的不同，离心后具有不同沉降速度的粒子处于不同的密度梯度层内，形成几条分开的样品区带，达到彼此分离的目的。比如要从静脉血中分离出单个核细胞，前一种分离液Ficoll将血液中的所有单个核细胞（淋巴细胞和单核细胞）分为一个层，同时提取。而Percoll分离液将血液中淋巴细胞和单核细胞分为两个梯度层，分别提取。梯度液在离心过程中以及离心完毕后取样时，起着支持介质和稳定剂的作用,避免因机械振动而引起已分层的粒子重悬。采用速率区带离心法时，需要严格控制离心时间,既要有足够的时间使各种粒子在介质梯度液中形成区带,又要避免任一待分离粒子形成沉淀状态。等密度区带离心法：是指液体分散体系中不同颗粒存在浮力密度差时，在离心力场下，颗粒或向下沉降，或向上浮起，一直沿梯度移动到它们密度恰好相等的位置上，即等密度点，形成区带的离心方法。等密度区带离心的离心效果取决于颗粒的浮力密度差，密度差越大，分离效果越好，与颗粒的大小和形状无关，但后两者决定着达到平衡的速率、时间和区带的宽度。该方法的特点：1.与样品粒子的密度有关。2.与样品粒子的大小和其他参数无关 。3.转速、温度不变,则延长离心时间也不能改变这些粒子的成带位置。
